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如何閱讀分析質(zhì)粒圖譜 ，病毒轉(zhuǎn)基因載體。

一、一個(gè)合格質(zhì)粒的組成要素 復(fù)制起始位點(diǎn)Ori?即控制復(fù)制起始的位點(diǎn)。
原核生物DNA分子中只有一個(gè)復(fù)制起始點(diǎn)。
而真核生物DNA分子有多個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn)。
抗生素抗性基因可以便于加以檢測(cè),如Amp+...歡迎下載！
如何閱讀分析質(zhì)粒圖譜 標(biāo)簽:圖譜質(zhì)粒閱讀2009-09-0114:12 載體主要有病毒和非病毒兩大類,其中質(zhì)粒DNA是一種新的非病毒轉(zhuǎn)基因載體。

一、一個(gè)合格質(zhì)粒的組成要素 復(fù)制起始位點(diǎn)Ori?即控制復(fù)制起始的位點(diǎn)。
原核生物DNA分子中只有一個(gè)復(fù)制起 始點(diǎn)。
而真核生物DNA分子有多個(gè)復(fù)制起始位點(diǎn)。
抗生素抗性基因可以便于加以檢測(cè)，如Amp+?,Kan+ 多?克隆位點(diǎn)MCS克隆攜帶外源基因片段 P/E?啟動(dòng)子/增強(qiáng)子 Terms終止信號(hào)? 加poly（A）信號(hào)?可以起到穩(wěn)定mRNA作用
二、如何閱讀質(zhì)粒圖譜
第一步：首先看Ori的位置，了解質(zhì)粒的類型（原核/真核/穿梭質(zhì)粒）
第二步：再看篩選標(biāo)記，如抗性，決定使用什么篩選標(biāo)記。

（1）Ampr水解β－內(nèi)酰胺環(huán)，解除氨芐的毒性。

（2）tetr可以阻止四環(huán)素進(jìn)入細(xì)胞。

（3）camr生成氯霉素羥乙�；�衍生物，使之失去毒性。
（4）neor（kanr） 氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶使G418（長那霉素衍生物）失活 （5）hygr使潮霉素β失活。

第三步：看多克隆位點(diǎn)（MCS）。
它具有多個(gè)限制酶的單一切點(diǎn)。
便于外源基因的 插入。
如果在這些位點(diǎn)外有外源基因的插入，會(huì)導(dǎo)致某種標(biāo)志基因的失活，而便于篩選。
決定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。

第四步：再看外源DNA插入片段大小。
質(zhì)粒一般只能容納小于10Kb的外源DNA 片段。
一般來說，外源DNA片段越長，越難插入，越不穩(wěn)定，轉(zhuǎn)化效率越低。

第五步：是否含有表達(dá)系統(tǒng)元件，即啟動(dòng)子－核糖體結(jié)合位點(diǎn)－克隆位點(diǎn)－轉(zhuǎn)錄 終止信號(hào)。
這是用來區(qū)別克隆載體與表達(dá)載體。
克隆載體中加入一些與表達(dá)調(diào)控 有關(guān)的元件即成為表達(dá)載體。
選用那種載體，還是要以實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑闇?zhǔn)繩。
啟動(dòng)子－核糖體結(jié)合位點(diǎn)－克隆位點(diǎn)－轉(zhuǎn)錄終止信號(hào) 啟動(dòng)子－促進(jìn)DNA轉(zhuǎn)錄的DNA順序，這個(gè)DNA區(qū)域常在基因或操縱子編碼順序 的上游，是DNA分子上可以與RNApol特異性結(jié)合并使之開始轉(zhuǎn)錄的部位，但啟 動(dòng)子本身不被轉(zhuǎn)錄。
? 增強(qiáng)子/沉默子－為真核?基因組（包括真核病毒基因組）中的一種具有增強(qiáng)鄰近 基因轉(zhuǎn)錄過程的調(diào)控順序。
其